液相色譜儀可分為六大部分:氣路系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)、溫控系統(tǒng)。氣路系統(tǒng)作用提供純凈、流量穩(wěn)定的載氣,攜帶樣品在儀器內(nèi)運(yùn)行全過(guò)程的動(dòng)力源。進(jìn)樣系統(tǒng)作用使試樣瞬間氣化,穩(wěn)定而不分解,快速無(wú)記憶效應(yīng),定量而不損失。液相色譜儀的核心部分色譜柱,混合試樣就是在色譜柱上完成分離。檢測(cè)系統(tǒng)將色譜柱分離出的各個(gè)組分轉(zhuǎn)換成電壓信號(hào)。記錄系統(tǒng)將檢測(cè)器的電壓信號(hào)記錄下來(lái)得到色譜圖。溫控系統(tǒng)是控制氣化室、柱箱、檢測(cè)器的溫度。
液相色譜儀也叫層析法,它是一種高效能的物理分別技術(shù),將它用于分析化學(xué)并合作恰當(dāng)?shù)臋z測(cè)手段,就成為色譜分析法。
液相色譜儀應(yīng)用是用于分別植物色素,其方法是這樣的:在一玻璃管中放入碳酸鈣,將含有植物色素(植物葉的提取液)的石油醚倒入管中。此時(shí),玻璃管的上端當(dāng)即出現(xiàn)幾種顏色的混合譜帶。然后用純石油醚沖刷,跟著石油醚的參與,譜帶不斷地向下移動(dòng),并逐漸分開(kāi)成幾個(gè)不同顏色的譜帶,持續(xù)沖刷就可分別接得各種顏色的色素,并可分別進(jìn)行斷定。色譜法也由此而得名。
現(xiàn)在的液相色譜儀早已不局限于色素的分別,其方法也早已得到了極大的發(fā)展,但其分別的原理仍然是一樣的。我們?nèi)匀唤兴V分析。
一、色譜分別底子原理:
由以上方法可知,在色譜法中存在兩相,一相是固定不動(dòng)的,我們把它叫做固定相;另一相則不斷流過(guò)固定相,我們把它叫做活動(dòng)相。
色譜法的分別原理就是利用待分別的各種物質(zhì)在兩相中的分配系數(shù)、吸附才干等親和才干的不同來(lái)進(jìn)行分別的。
運(yùn)用外力使含有樣品的活動(dòng)相(氣體、液體)經(jīng)過(guò)一固定于柱中或平板上、與活動(dòng)相互不相溶的固定相外表。當(dāng)活動(dòng)相中帶著的混合物流經(jīng)固定相時(shí),混合物中的各組分與固定相發(fā)作相互效果。
由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異,與固定相之間發(fā)作的效果力的大小、強(qiáng)弱不同,跟著活動(dòng)相的移動(dòng),混合物在兩相間經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的分配平衡,使得各組分被固定相保存的時(shí)間不同,然后按一定次第由固定相中先后流出。與恰當(dāng)?shù)闹髾z測(cè)方法結(jié)合,完成混合物中各組分的分別與檢測(cè)。
二、色譜分類(lèi)方法:
色譜分析法有許多種類(lèi),從不同的角度動(dòng)身能夠有不同的分類(lèi)方法。
從兩相的狀況分類(lèi):
色譜法中,活動(dòng)相可所以氣體,也可所以液體,由此可分為氣相色譜法(GC)和液相色譜法(LC)。固定相既可所以固體,也可所以涂在固體上的液體,由此又可將氣相色譜法和液相色譜法分為氣-液色譜、氣-固色譜、液-固色譜、液-液色譜。
液相色譜儀通常由以下五個(gè)部分組成:
1)氣源和載氣的操控和測(cè)量
(1)氣源
氣源多選用高壓瓶(氫、氮、氬等)做高純氣的儲(chǔ)存器,并裝有減壓閥,使高壓氣體減壓
成低壓氣體(0.1-O.5MPa)以供運(yùn)用。鋼瓶供應(yīng)的氣體稱(chēng)為活動(dòng)相,又稱(chēng)載氣。載氣的效果
液相色譜儀主要是把樣品輸送到色譜柱和檢測(cè)器中。
(2)流量調(diào)理閥
能夠調(diào)理載氣的流速,常用的有穩(wěn)壓閥和針形閥。
(3)流速計(jì)用以測(cè)量載氣流速。常用的有轉(zhuǎn)子流量計(jì)和皂膜流速計(jì)等。
2)色譜柱和恒溫器
(1)色譜柱
液相色譜儀的效果是把混合物分別成單一組分。一般常用不銹鋼管或銅管內(nèi)填充固定相構(gòu)
成,管子成U型或螺絲形。一般柱管內(nèi)徑為2—8mm,還有內(nèi)徑更小的稱(chēng)為毛細(xì)管色譜柱, 柱管長(zhǎng)度一般為1-4m或更長(zhǎng)。
(2)恒溫器 為了堅(jiān)持色譜柱或檢測(cè)器內(nèi)的溫度穩(wěn)定,色譜柱和檢測(cè)器多置于恒溫器內(nèi)。一般常選用空氣恒溫方法。
3)進(jìn)樣器 把樣品通進(jìn)色譜柱的元件稱(chēng)進(jìn)樣器,其間包括汽化室和進(jìn)樣?xùn)|西,汽化室的效果是將液 體或固體樣品瞬間汽化為蒸汽。進(jìn)樣?xùn)|西常有定量閥和注射器。
4)檢測(cè)器
檢測(cè)器又稱(chēng)斷定器是用來(lái)檢測(cè)柱后流出的組分,并以電壓或電流信號(hào)顯示出來(lái),常用的
檢測(cè)器有熱導(dǎo)池式;氫火焰離子化式;電子捕獲式和火焰光度式檢測(cè)器數(shù)種。
5)主動(dòng)記錄儀 記錄儀的效果是將檢測(cè)器輸出的信號(hào)記錄下來(lái),作為定性,定量分析的根據(jù)。